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人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
發(fā)布時間:2025/8/26瀏覽:135次
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  人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

  BS-0367人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒

  一、實(shí)驗(yàn)原理

  采用雙抗體夾心法:

  包被階段:微孔板預(yù)包被抗人sTNFαR單克隆抗體(固相抗體)。

  結(jié)合階段:樣本中sTNFαR抗原與固相抗體結(jié)合,后加入生物素標(biāo)記的二抗形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。

  顯色階段:TMB底物經(jīng)HRP催化顯色,**終止液(2mol/L H?SO?)**終止反應(yīng)并轉(zhuǎn)為黃色,450nm測OD值。

  二、試劑盒組成

  組分  規(guī)格  儲存條件

  酶標(biāo)包 被板96孔/48孔4℃避光

  標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml×1瓶-20℃分裝保存

  終止液 6ml×1瓶2-8℃

  生物素標(biāo)記抗體 6ml×1瓶4℃避光

  顯色劑(A/B液) 各6ml4℃避光

  三、樣本處理規(guī)范

  血清:全血室溫凝固30min,2000×g離心20min,避免溶血。

  血漿:肝素抗凝,1000×g離心30min,去除顆粒物。

  細(xì)胞裂解液:PBS洗滌后裂解,14000×g離心10min取上清。

  四、操作步驟

  加樣:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μL + 生物素抗體100μL,37℃孵育60min。

  洗滌:洗板5次,拍干(避免殘留)^^2^^。

  顯色:TMB避光孵育15min,終止液50μL/孔,立即測OD值。

  五、數(shù)據(jù)分析

  標(biāo)準(zhǔn)曲線:四參數(shù)擬合,樣本OD值代入曲線計(jì)算濃度。

  質(zhì)控要求:空白孔OD值應(yīng)<0.1,板內(nèi)/板間CV<10%。

  六、注意事項(xiàng)

  終止液安全:含強(qiáng)酸,操作時佩戴防護(hù)裝備。

  時效性:加入終止液后需30分鐘內(nèi)檢測,防止吸光度衰減。

  干擾因素:避免NaN3、溶血或高脂樣本。

  注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù),如果其他具體信息請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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