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菌種保存管規(guī)范操作與關(guān)鍵要點
以下是關(guān)于菌種保存管使用方法的關(guān)鍵要點，結(jié)合關(guān)鍵步驟與常見注意事項：
一、菌種保存管使用步驟
材料準備?
選擇聚丙烯材質(zhì)凍存管，內(nèi)含25顆多孔瓷珠及含低溫保護劑(如20%甘油)的保存液?。
未使用的凍存管可在室溫或2-8℃保存12個月，使用前需檢查是否漏液或保存液混濁?。
菌懸液制備?
挑取新鮮菌落配成3-4麥氏比濁度的菌懸液，接種至凍存管內(nèi)?。
擰緊管蓋后輕柔顛倒4-5次混勻，避免旋搖導(dǎo)致瓷珠破損?。
保存條件?
短期保存?：-20℃可維持1-5年菌種活性?。
長期保存?：-80℃可延長至5-10年，液氮氣相(-150℃)或液相(-196℃)保存效果。
二、關(guān)鍵注意事項
操作規(guī)范?
全程在生物安全柜中操作，避免雜菌污染?。
瓷珠取出后不可放回凍存管，單次使用后需滅菌處理?。
常見誤區(qū)?
錯誤保存溫度?：部分菌種(如銅綠假單胞菌)在4℃易自溶，需根據(jù)菌種特性選擇溫度?。
保護劑濃度不當(dāng)?：甘油濃度建議10-20%，過高或過低均影響凍存效果?。
復(fù)蘇方法錯誤?：需快速水浴解凍(38-40℃)，緩慢復(fù)溫會導(dǎo)致冰晶損傷細胞?。
三、保存效果優(yōu)化建議
分裝策略?：單次制備多管分裝，避免反復(fù)凍融?。
定期檢測?：通過涂平板或死活染色法監(jiān)測菌種存活率，及時復(fù)壯退化菌株。
如需進一步了解特定菌種的保存細節(jié)，可參考專業(yè)保藏中心的技術(shù)規(guī)程?。
注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒
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