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ELISA直接法、間接法、競爭法和夾心優(yōu)缺點對比
更新時間:2025-09-22瀏覽:126次

  ELISA直接法、間接法、競爭法和夾心優(yōu)缺點對比

  以下是ELISA四種主要方法(直接法、間接法、競爭法、夾心法)的優(yōu)缺點對比,本生綜合了高可信度來源的分析:

  一、直接法

  原理?:抗原直接包被于固相載體,酶標(biāo)一抗直接結(jié)合抗原并顯色?。

  優(yōu)點?:

  操作步驟少,檢測速度快(無需二抗)?。

  避免交叉反應(yīng)(無二抗干擾)?。

  缺點?:

  靈敏度低(信號無放大)?。

  背景高(非特異性吸附雜質(zhì)蛋白)?。

  需為每種靶標(biāo)定制酶標(biāo)一抗,成本高?。

  二、間接法

  原理?:抗原包被后,先加一抗,再用酶標(biāo)二抗檢測一抗?。

  優(yōu)點?:

  靈敏度高(二抗信號放大)?。

  經(jīng)濟靈活(一種酶標(biāo)二抗可檢測多種一抗)?。

  缺點?:

  步驟多(需二抗孵育)?。

  可能交叉反應(yīng)(二抗非特異性結(jié)合)?。

  三、競爭法

  原理?:待測抗原與酶標(biāo)抗原競爭結(jié)合有限抗體,顯色信號與待測抗原量成反比?。

  優(yōu)點?:

  適用于小分子或低純度樣本?。

  數(shù)據(jù)重現(xiàn)性好?。

  缺點?:

  靈敏度與特異性較低?。

  需精確控制競爭條件?。

  四、夾心法

  原理?:雙抗體夾心抗原(捕獲抗體+檢測抗體)?。

  優(yōu)點?:

  高靈敏度與特異性(雙抗體識別不同表位)?。

  無需純化抗原?。

  缺點?:

  需抗原具兩個以上抗體結(jié)合位點?。


圖片.png


  注:夾心法需注意抗體配對驗證,競爭法需優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍?。

  注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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