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　　Elisa實驗：稀釋標準品實驗步驟

　　以下是ELISA實驗中標準品稀釋的詳細步驟總結，綜合多個實驗操作視頻的關鍵步驟：

　　一、標準品稀釋前準備?

　　試劑與耗材?

　　7支空白EP管(編號S0-S6)

　　標準品樣本稀釋液(如1x PBS或說明書指定緩沖液) 本生試劑盒

　　渦旋振蕩器、移液器(建議10-100μL和100-1000μL規(guī)格)

　　標準品活化?

　　凍干標準品需先離心1-2分鐘使粉末集中管底

　　加入指定體積蒸餾水(如200μL)，渦旋混勻5秒，靜置10-30分鐘至溶解

　　二、標準品稀釋步驟?

　　初始稀釋?

　　在S6管中加入500μL標準品樣本稀釋液

　　吸取溶解后的標準品母液500μL加入S6管，渦旋混勻5秒

　　倍比稀釋?

　　從S6管取500μL加入S5管，混勻

　　重復上述步驟至S1管，S0管僅含稀釋液(空白對照)

　　關鍵點：每次稀釋需充分混勻，避免濃度誤差

　　特殊處理?

　　高濃度標準品(如血清樣本)需酸化處理：加鹽酸20μL混勻，孵育10分鐘后加氫氧化鈉20μL終止

　　三、稀釋后操作?

　　分裝與保存?

　　現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復凍融

　　分裝體積建議：50μL/孔(酶標板使用)

　　質量控制?

　　檢查各管液體混勻狀態(tài)，避免沉淀

　　酸化樣本需20倍稀釋后使用

　　四、常見問題規(guī)避?

　　錯誤示例?：未充分混勻導致梯度不線性

　　解決方案?：使用排槍或自動移液器降低操作誤差

　　(注：具體稀釋比例需根據(jù)試劑盒說明書調整，不同廠家標準品濃度可能差異較大)

　　注：以上資料僅供參考，具體產(chǎn)品信息請咨詢技術老師或品牌供應商。

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